上海ELISA試劑盒的檢測范圍和實驗應該注意的問題

更新時間：2019-07-25

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　　上海ELISA試劑盒的檢測范圍和實驗應該注意的問題

　　ELISA實驗中應注意的問題有：樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品與試劑混合、樣品添加、培養(yǎng)等。上海ELISA試劑盒具有準確度高、靈敏度高、特異性強等優(yōu)點，深受廣大用戶的喜愛。

　　上海ELISA試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類：除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿(不同抗凝劑)，細胞上清，和細胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;

　　上海ELISA試劑盒的檢測范圍：也就是標曲范圍，特別要注意待測樣本濃度是否落在標曲范圍內(nèi)，對于濃度很高的樣本，可以先進行預實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。

　　elisa中的稀釋線性及回收率：

　　a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性，是將樣本梯度稀釋下來，看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的稀釋倍數(shù);

　　b.稀釋線性也有做加標稀釋線性的情況，加標稀釋線性是將標準品加入樣本中測定加入的標準品濃度測定是否準確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適;

　　上海ELISA試劑盒的其它指標：

　　a.靈敏度：試劑盒能夠檢測到的樣本低濃度的能力，如果待檢指標含量很低，需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒;

　　b.板間和板內(nèi)的變異系數(shù)(CV%):反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻，CV%一般小于10%比較好。

　　試劑盒的有效期：試劑盒的有效期一般是半年至一年，樣本準備時間需要考慮到試劑盒的有效期。

　　ELISA法已被廣泛應用于各種抗原和抗體的測定中。ELISA的測定有許多影響因素。除了正常的反應外，在檢測過程中經(jīng)常會出現(xiàn)一些錯誤的結果。導致ELISA測定結果錯誤的主要原因是：樣品因素；試劑因素；操作因素。

　　上海ELISA試劑盒樣品稀釋

　　常用產(chǎn)品的稀釋倍數(shù)由大量試驗確定，以確保試驗的敏感性和特異性。酶聯(lián)免疫吸附反應(ELISA)是一種高度敏感的反應。如果不稀釋血清，則不可避免地會產(chǎn)生強烈的非特異性反應和假陽性。

　　二.工具包平衡

　　所有ELISA試劑和試紙條應在試驗前與室溫(約25℃)保持平衡，并應在室溫下放置20分鐘以上。過短的平衡時間會導致試劑混合不足、孵育時間縮短和ELISA反應不足。在冬季低溫下，試劑盒可放置在37℃處20分鐘。

　　三.樣品和試劑的混合

　　上海ELISA試劑盒樣品在稀釋前后必須充分混合，所有試劑必須在加入樣品前搖勻，以確保試驗的均勻性。